Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8400-36:2015 do Viện Thú y biên soạn, Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn đề nghị, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố. Tiêu chuẩn này quy định quy trình chẩn đoán hội chứng suy mòn ở lợn sau cai sữa (PMWS) do Porcine Circovirus typ 2 (PCV2) gây ra.

Dưới đây là tóm tắt chi tiết nội dung Phần mở đầu và các điều khoản đầu (từ Điều 1 đến Điều 4) của Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8400-36:2015:

Điều 1: Phạm vi áp dụng

• Tiêu chuẩn này quy định quy trình chẩn đoán hội chứng suy mòn ở lợn sau cai sữa (Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome - PMWS) do virus Circovirus typ 2 ở lợn (Porcine Circovirus type 2 - PCV2) gây ra.
• Quy trình chẩn đoán bao gồm các bước xác định triệu chứng lâm sàng, biến đổi bệnh tích (đại thể và vi thể), và các phương pháp xét nghiệm phòng thí nghiệm để khẳng định sự hiện diện của virus.
• Tiêu chuẩn áp dụng đối với các cơ quan quản lý chuyên ngành thú y, các phòng thử nghiệm, chẩn đoán bệnh động vật và các tổ chức, cá nhân thực hiện công tác giám sát, phòng chống dịch bệnh trên đàn lợn tại Việt Nam.

Điều 2: Tài liệu viện dẫn

Để áp dụng hiệu quả tiêu chuẩn này, việc viện dẫn các tài liệu kỹ thuật liên quan là bắt buộc nhằm đảm bảo tính chuẩn xác trong thao tác xét nghiệm:

• TCVN 8400-1: Bệnh động vật - Quy trình chẩn đoán - Phần 1: Quy trình chung về chẩn đoán, xét nghiệm bệnh động vật.
• Các tài liệu hướng dẫn của Tổ chức Thú y Thế giới (WOAH/OIE) về quy trình chuẩn đoán và vaccine phòng bệnh cho động vật trên cạn.

Điều 3: Thuật ngữ, định nghĩa và chữ viết tắt

Tiêu chuẩn thống nhất sử dụng các thuật ngữ chuyên ngành và chữ viết tắt cốt lõi sau đây:

• PMWS (Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome): Hội chứng suy mòn nhiều hệ thống ở lợn sau cai sữa, đặc trưng bởi sự suy giảm miễn dịch, còi cọc, chậm lớn và tỷ lệ tử vong cao ở lợn từ 5 đến 18 tuần tuổi.
• PCV2 (Porcine Circovirus type 2): Circovirus typ 2 ở lợn, là virus không có vỏ bọc, chứa DNA sợi đơn vòng, thuộc họ Circoviridae, là tác nhân chính gây ra hội chứng PMWS.
• PCR (Polymerase Chain Reaction): Phản ứng chuỗi polymerase, phương pháp sinh học phân tử dùng để phát hiện sự hiện diện của DNA virus PCV2 trong mẫu bệnh phẩm.
• IHC (Immunohistochemistry): Phương pháp hóa mô miễn dịch, kỹ thuật nhuộm đặc hiệu dùng để phát hiện kháng nguyên virus PCV2 trực tiếp trên các lát cắt mô bệnh lý.

Điều 4: Thiết bị, dụng cụ, thuốc thử và vật liệu thử

Quy trình chẩn đoán đòi hỏi hệ thống trang thiết bị và hóa chất đạt tiêu chuẩn phòng thí nghiệm sinh học an toàn cấp 2 trở lên:

• Thiết bị và dụng cụ: Máy nhân gen PCR hoặc Real-time PCR; máy ly tâm lạnh tốc độ cao; tủ ấm; tủ lạnh sâu (từ âm 20 độ C đến âm 80 độ C) dùng để bảo quản mẫu bệnh phẩm và các sinh phẩm xét nghiệm; bộ pipet tự động các dải thể tích; bể ổn nhiệt; tủ an toàn sinh học cấp 2 để đảm bảo an toàn cho kỹ thuật viên.
• Thuốc thử và hóa chất: Kít tách chiết DNA chuyên dụng; các cặp mồi (primers) đặc hiệu phục vụ phản ứng PCR/Real-time PCR được thiết kế để nhận diện đoạn gen đích của PCV2; các hóa chất pha chế dung dịch đệm (buffer); hóa chất nhuộm màu mô học (Hematoxylin và Eosin) và kháng thể đơn dòng hoặc đa dòng đặc hiệu phục vụ xét nghiệm hóa mô miễn dịch (IHC).
• Mẫu bệnh phẩm (Vật liệu thử): Mẫu bệnh phẩm phải được thu thập từ lợn nghi mắc bệnh, ưu tiên các cơ quan đích có tải lượng virus cao bao gồm: hạch lympho (đặc biệt là hạch bẹn nông, hạch lâm ba phổi, hạch màng treo ruột), phổi, lách, thận và amidan. Mẫu phải được bảo quản lạnh và vận chuyển nhanh chóng về phòng thí nghiệm theo đúng quy chuẩn kỹ thuật.